液相色譜儀(Liquid Chromatography,LC)是一種常用的分離和分析技術(shù),其基本原理是利用樣品在流動相和固定相之間的分配行為,通過不同物質(zhì)在流動相和固定相之間的分配系數(shù)差異來實現(xiàn)分離和檢測。
液相色譜儀的操作步驟如下:
1. 樣品制備:將待測樣品溶解或懸浮在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,并篩選掉雜質(zhì)。
2. 色譜柱裝置:將色譜柱裝入液相色譜儀中,柱內(nèi)填充固定相。
3. 流動相配置:根據(jù)樣品性質(zhì)和柱內(nèi)固定相的特性,選擇合適的流動相,并將其配置好。
4. 進(jìn)樣:將樣品注入進(jìn)樣器中,通過自動或手動控制,將樣品引入柱內(nèi)。
5. 色譜分離:樣品在柱內(nèi)流動相和固定相之間進(jìn)行分配,不同物質(zhì)在流動相和固定相之間的分配系數(shù)不同,因此在柱內(nèi)會發(fā)生分離。
6. 檢測:通過檢測器檢測柱流出液中物質(zhì)的含量和濃度,得到分離結(jié)果。
液相色譜儀的主要原理是基于樣品在流動相和固定相之間的分配行為,該分配行為受到物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)、環(huán)境條件和柱內(nèi)固定相的特性等多種因素的影響。在柱內(nèi),樣品分子會在流動相和固定相之間不斷分配,直到達(dá)到平衡,形成動態(tài)平衡狀態(tài)。不同物質(zhì)在流動相和固定相之間的分配系數(shù)不同,因此會在柱內(nèi)發(fā)生分離。通過檢測器檢測柱流出液中物質(zhì)的含量和濃度,得到分離結(jié)果。